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em murganhos tratados com doses crescentes da combinacao ATN + MF. Em
ambos os casos, os clones obtidos, AS-MFATN-5 e AS-ATNMF-1,
apresentaram niveis acrescidos de resistencia a ATN + MF quando
comparados aos seus progenitores AS-15MF e AS-ATN, respectivamente.
A analise genetica dos clones AS-MFATN-5 e AS-ATNMF-1 revelou que os
mesmos haviam adquirido uma copia extra do gene
mdr1
, e que a aquisicao
desta copia extra foi acompanhada
pelo aumento nos niveis de expressao de RNA e proteina no clone AS-ATNMF-
1.
Adicionalmente, a re-sequenciacao do genoma completo do clone AS-ATNMF-
1 atraves do metodo Solexa revelou a presenca adicional de duas novas
mutacoes nao sinonimas nos genes PCAS_132020 e PCAS_143160, ambos
de funcao desconhecida.
O clone AS-ATNMF-1 foi ainda comparado ao seu progenitor AS-ATN em
ensaios de competicao intra-hospedeiro, com o proposito de avaliar um
potencial custo biologico da resistencia a combinacao ATN + MF. Alem disso, o
parasita AS-ATNMF-1 foi comparado com o clone AS-ATN sub-inoculado vinte
e sete vezes em murganhos na ausencia de tratamento com farmaco (AS-
ATN27P), com o objectivo de verificar se sub-inoculacoes consecutivas
estariam associadas a um aumento no
fitness
destes parasitas. Nestes
ensaios, enquanto o clone AS-ATNMF-1 foi capaz de superar o seu progenitor
AS-ATN em termos de multiplicação parasitaria, esta mesma tendencia nao foi
observada quando em competicao com AS-ATN27P.
Colectivamente, os resultados descritos neste trabalho sugerem que a
amplificacao do gene
mdr1
desempenha um papel importante na resistencia a
ATN + MF gerada neste modelo experimental. No entanto, mutacoes adicionais
podem tambem ter algum papel nessse fenotipo.
Adicionalmente, a presenca destas mutacoes nao esta associada a uma
reducao no “fitness” do clone resistente AS-ATNMF-1 quando comparado ao
progenitor sensivel a ATN + MF.
Em conclusao, a eficacia do tratamento baseado em ACTs pode ser
comprometida pelo aparecimento de parasitas portadores de um mecanismo
generico de evasao a acção farmacologica, que previna a actuacao dos dois
componentes da combinacao em simultaneo.
Alem disso, parasitas resistentes podem nao apresentar reducao no “fitness”, o
que poderia contribuir para o seu rapido alastramento.
Os resultados apresentados neste trabalho e a suas implicacoes inerentes
poderao servir de base para o aperfeicoamento das terapias utilizando
combinacoes de farmacos e das ferramentas moleculares para a monitorizacao
da eficacia dos ACTs em populacoes parasitarias selvagens.
Resumo:
A malária constitui um grave problema de saúde pública na
República Democrática de Timor Leste (RDTL), caracterizada por ser uma
doença endémica em todos os distritos, com as mais elevadas taxas de
mortalidade e morbilidade nas crianças e mulheres grávidas. Desde a
independência em 2002, o número de casos da malária tem vindo a aumentar
e a inexistência de dados epidemiológicos e poucos estudos ligados à
resistência aos antimaláricos alertaram para a necessidade de actualizar o
conhecimento da situação, com o objectivo de fomentar uma política de
intervenção no domínio da vigilância e controlo da malária no país. Deste
modo, este trabalho teve como finalidade avaliar a frequência da malária em
cada distrito estudado, identificar e caracterizar os factores causais da sua