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de as controlar/erradicar, atualmente as Doenças Tropicais Negligenciadas são
endémicas em 149 países. Desta realidade surge a necessidade de melhor
compreensão das suas interações com o hospedeiro vertebrado. Neste sentido,
pretendeu-se caracterizar bioquímicamente e biologicamente as metaloproteases,
enzimas comuns a tripanossomatídeos envolvidas nos processos de virulência
deste trio de protozoários de importância clínica. Traçou-se o perfil enzimático, em
géis de colagénio, gelatina e caseína, de extratos de formas promastigotas de
L.
amazonensis
,
L. guyanensis
,
L. infantum
,
L. shawi
; de formas epimastigotas e
tripomastigotas das estirpes Y, Bolívia, e QMM5 de
T. cruzi
e de tripomastigotas
sanguíneos de
T. b. brucei
. As concentrações mínimas inibitórias de
metaloproteases foram estimadas na presença da 1,10-fenantrolina, um inibidor de
metaloproteases. Para avaliar a atividade metaloproteolítica de cada extrato foi
otimizada uma metodologia que permitiu quantificar o nível de atividade enzimática
na presença e na ausência da 1,10-fenantrolina. O estudo das propriedades
biológicas de cada extrato consistiu na avaliação da interação das
metaloproteinases dos diferentes tripanosomatídeos com eritrócitos humanaos (Eh)
e com possível atividade hemolítica mediada pelo sistema complemento. Todos os
extratos foram enzimaticamente ativos nos diferentes substratos e cada parasita
evidenciou um perfil zimográfico distinto. Nos extratos de
Leishmania
spp. foi
observada a expressão de enzimas com massa molecular entre os 50 e 80 kDa,
possivelmente a glicoproteína de 63 kDa (gp63). Em extratos de
T. cruzi
e
T. b.
brucei
foi detetado, respetivamente, a expressão de enzimas de aproximadamente
40 e 20 kDa. O decréscimo da atividade enzimática total dos extratos na presença
de concentrações crescentes de 1,10-fenentrolina confirmou a natureza
metaloproteica das enzimas. O perfil de atividade das metaloproteases de
L. shawi
mostrou-se distinto do evidenciado pelas restantes espécies e cada estirpe de
T.
cruzi
exibiu um padrão metaloproteolítico diferente. Das metaloproteases estudadas,
a de
T. b. brucei
apresentou a menor velocidade de reação enzimática. iii
Os resultados obtidos nos ensaios de sensibilização de Eh por extratos de
Leishmania
,
T.cruzi
e
T. b. brucei
permitiram dar início à criação de um modelo
biológico de infeção tendo ficado estabelecido que em
Leishmania
spp. ocorre a
sensibilização de Eh pelas metaloproteases que, por sua vez, são lisados pelo
sistema complemento. Dada a importância das funções biológicas destas enzimas,
o conhecimento do perfil de expressão nos diferentes tripanossomatídeos e dos
mecanismos biológicos de infeção pode constituir uma oportunidade para a
identificação de novos alvos terapêuticos e, consequentemente, para o
desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e terapêuticas.
MUGGLI, Zélia Maria Araújo da Silva (2015) Impacto da crise
económica na saúde das crianças: análise das percepções de
Profissionais de Saúde do ACES de Sintra, Dissertação de Mestrado em
Saúde e Desenvolvimento, IHMT, Lisboa.