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A n a i s d o I HM T
Análise genética de estirpes de
Schistosoma mansoni
sensíveis
e resistentes a praziquantel por
rapd-pcr
Genetic analysis of
Schistosoma mansoni
sensitive and resistant strains to praziquantel using
rapd-pcr
Tiago Mendes
Mestrando de Parasitologia Médica,
Unidade de Ensino e Investigação de Parasitologia Médica (UEIPM),
Grupo de Helmintologia e Malacologia Médicas (HMM),
Instituto de Higiene e MedicinaTropical, Universidade Nova de Lisboa.
tiago.mendes@ihmt.unl.ptManuela Calado
Professora auxiliar, UEIPM, HMM, IHMT
Isabel Clemente
Técnica especialista, UEIPM, HMM, IHMT
Silvana Belo
Professora auxiliar, UEIPM, HMM, IHMT
Ana Afonso
Investigadora auxiliar, UEIPM, HMM, IHMT
Resumo
O praziquantel (PZQ) é o fármaco de eleição no tratamento da
schistosomose, devido à sua alta taxa de cura e por não demostrar
efeitos secundários significativos mas recentemente têm sido
reportados cada vez mais casos de resistência ou de aumento
de tolerância a este fármaco. Devido a estas observações, a
OMS recomenda a monitorização contínua de
Schistosoma
spp
potencialmente resistentes ao fármaco.
No laboratório de Helmintologia foi seleccionada uma linha de
Schistosoma mansoni
, resistente a PZQ na dose de 120 mg/Kg, após
pressão de fármaco constante ao longo de vários ciclos. Foram
recolhidos parasitas adultos de
S.mansoni
da estirpe resistente e de uma
estirpe sensível e procedeu-se à análise doDNAdos vermes por
Random
Amplified Polymorphic DNA-Polymerase Chain Reaction
(
RAPD-PCR
).
Foi possível observar polimorfismos em 7 dos 10
primers
. Uma
vez observadas as diferenças polimórficas entre parasitas sensíveis
e resistentes, calculou-se o coeficiente de similaridade (
Dice’s
coefficient
).
A compreensão de polimorfismos genéticos associados à resistência
poderão contribuir para a identificação futura de sequências
relacionadas com a resistência/tolerância de
S. mansoni
ao
tratamento por PZQ e para a identificação de parasitas resistentes
no campo, assim como para o desenvolvimento de novas estratégias
de controlo para a schistosomose.
Palavras Chave:
Schistosoma mansoni
,
RAPD-PCR
, resistência ao Praziquantel.
Abstract
Praziquantel (PZQ) is the drug of choice in the treatment of
schistosomiasis due to its high cure rates and no significant
side effects. Currently, more and more cases of resistance or
increased tolerance to PZQ have been reported, consequently,
there were recommendations for continuous monitoring of
drug resistance.
In our laboratory, we selected a parasitic line of
Schistosoma
mansoni
, through constant drug pressure over several cycles,
which was resistant to 120 mg/kg PZQ.
Adult parasites of
S. mansoni
from the resistant and from a
sensible strain were collected; the DNA was extracted and
analyzed through Random Amplified Polymorphic DNA-
Polymerase Chain Reaction (
RAPD-PCR
).
We observed genetic polymorphism in 7 of 10
primers
tested. Once observed the polymorphic differences between
susceptible and resistant parasites, we calculated the similarity
coefficient (Dice’s coefficient).
Understanding the genetic polymorphism associated with
resistance may contribute to the future identification of
related sequences with the resistance/tolerance of
S. mansoni
to PZQ treatment and for identification of resistant parasites
in the field as well as for the development of new strategies to
schistosomiasis control.
KeyWords:
Schistosoma mansoni
,
RAPD-PCR
, Praziquantel resistance.
Artigo Original