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vector e o parasita são muito complexas e, estão longe de serem
completamente compreendidas. Este estudo tem como objectivo principal
contribuir para o conhecimento da resposta do mosquito à infecção por
Plasmodium
, focando-se no papel das enzimas de detoxificação. Para atingir
este objectivo realizou-se uma análise transcriptómica com microarrays, com o
intuito de identificar alterações de transcrição de enzimas de detoxificação no
mosquito
Anopheles gambiae
em resposta à infecção por
Plasmodium
. Esta
análise permitiu identificar alterações na expressão de 254 genes de
destoxificação no estômago e corpo gordo de
A. Gambiae
durante a invasão do
intestino médio pelos oocinetos e durante a libertação dos esporozoítos do
oocisto. Os resultados mostraram que a invasão do intestino médio pelos
oocinetos causou alterações num maior número de genes em ambos os
tecidos estudados, sendo o intestino médio do mosquito o tecido mais afectado
nas duas fases da infecção do parasita. De todos os genes de destoxificação
com expressão alterada, as tubulinas e os citocromos P450 destacaram-se e
foram escolhidos para continuar o estudo. As tubulinas foram seleccionadas
porque estão associadas à invasão do epitélio do intestino médio e a sua
função na resposta à invasão do
Plasmodium
ainda não está bem definida. Os
citocromos P450 foram seleccionados porque já foram descritos como tendo a
expressão alterada em resposta ao
Plasmodium
e a outras infecções. Para
identificar e caracterizar o papel das tubulinas durante a infecção pelo parasita
e a sua possível associação com os citocromos P450 foi utilizado o
silenciamento génico por RNA de interferência e a injecção de inibidores
químicos de tubulinas. O silenciamento e co-silenciamento das tubulinas
causaram um aumento da taxa e intensidade da infecção. No entanto, apesar
de o aumento ser consistente não foi significativo. Por outro lado, a injecção de
paclitaxel, um inibidor de tubulinas, aumentou significativamente a taxa e
intensidade da infecção, fortalecendo a hipótese do envolvimento das tubulinas
na resposta à infecção por
Plasmodium
. Este trabalho também mostrou que o
co-silenciamento da
tubulina A
e
tubulina B
e a injecção do inibidor de tubulinas
colchicine causam alterações significativas na expressão da
CYP6Z2
, sendo
este proposto como um possível elo de ligação entre as tubulinas e os
citocromos P450. Finalmente, uma análise comparativa foi realizada para
estudar as regiões promotoras dos citocromos P450:
CYP6M2
e o
CYP6Z1
.
Este estudo obteve novos dados sobre compostos que activam estes
citocromos e quais os possíveis factores de transcrição envolvidos. Dos
diferentes estímulos utilizados, a exposição a insecticidas e a bactérias foram
os que mais afectaram estes citocromos. O conjunto total das diferentes
abordagens utilizadas neste trabalho contribuiu para aumentar o conhecimento
do papel das enzimas de destoxificação durante a passagem do parasita da
malária pelo mosquito vector.
FORTES, Filomeno Coelho (2011) Perfil epidemiológico das
principais doenças parasitárias endémicas em Angola: malária
tripanossomose humana africana oncocercose schistosomose
urinária, Dissertação de Doutoramento no ramo de Ciências
Biomédicas, especialidade Parasitologia, IHMT, Lisboa.