110 / 124
110
isolados clínicos que apresentam um fenótipo multi-resistente. A combinação
das novas abordagens descritas anteriormente,
i.e.
, a caracterização de
isolados que apresentam um fenótipo multirresistente mediado por sistemas de
efluxo, aliada à busca de novos e efectivos EPIs, pode contribuir para o
controlo e tratamento eficaz de infecções multi-resistentes. O futuro o dirá…
MARTINS, Marta Lopes (2008) The antimycobacterial activity of
thioridazine derivatives against drug resistant Mycobacterium
tuberculosis: In vitro, ex vivo and in vivo studies, Dissertação de
Doutoramento no ramo de Ciências Biomédicas, especialidade de
Microbiologia. IHMT. Lisboa.
RESUMO
O objectivo principal desta tese foi o de avaliar a acção da tioridazina (TZ), bem
como de compostos derivados desta, obtidos por manipulação química, como
agentes com actividade contra
Mycobacterium tuberculosis
, em particular
contra
M. tuberculosis
multi-resistente (MDR-TB). Desta forma foram obtidos
vinte e dois derivados e efectuados testes de toxicidade e mutagenicidade pelo
método de exclusão com azul de trypan (realizado em linfócitos humanos) e o
teste de Ames, respectivamente. Todos os derivados não tóxicos e não
mutagénicos foram testados
in vitro
contra estirpes de
Staphylococcus aureus
resistente à meticilina (MRSA), que foi o microrganismo modelo utilizado
durante todo o trabalho, e estirpes de MDR-TB. Visto que a tuberculose é uma
infecção do macrófago alveolar, estes estudos foram subsequentemente
aplicados a macrófagos infectados. Desta forma, é importante analisar a
actividade que estes compostos apresentam dentro do macrófago, local onde
normalmente a micobactéria se encontra. Iniciaram-se estudos animais com a
TZ, de forma a verificar a eficácia deste composto em curar murganhos Balb/C
infectados com
M. tuberculosis
H37Rv ATCC27294. Desta forma foi possível
optimizar parâmetros, tais como, a via de infecção, a concentração de
composto a administrar, entre outros. Os resultados obtidos demonstraram que
dos vinte e dois derivados nenhum apresentava toxicidade ou efeitos
mutagénicos, nas condições testadas. Desta forma, os vinte e dois derivados
foram seleccionados para estudos
in vitro
contra estirpes de
S. aureus
e de
M.
tuberculosis
. Dos estudos
in vitro
foi possível verificar que seis derivados
apresentaram uma maior actividade do que a TZ e desta forma foram
seleccionados para os estudos
ex vivo
. Quando testados em macrófagos
infectados três derivados demonstraram um efeito marcado na activação das
células fagocitárias (“enhancement of the killing activity”), sendo um dos
derivados ainda mais activo do que a TZ. Dos estudos em animais, foi possível
seleccionar as condições a serem implementadas em estudos futuros com os
derivados mais activos. De todos os resultados obtidos durante esta tese foi
possível desenvolver um modelo baseado na interacção do macrófago com a
bactéria e a subsequente acção destes compostos. O modelo desenvolvido
(“macrophage model”) pode assim contribuir para clarificar o que ocorre a nível
intracelular aquando da adição dos compostos ao meio de cultura.
Devido à inovação das abordagens desenvolvidas durante esta tese, outras
potenciais fontes de compostos tuberculostáticos foram exploradas, tais como,
plantas e compostos SILA. Os estudos desenvolvidos demonstraram que
extractos da planta
Carpobrotus edulis
podem apresentar actividade