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A doença do sono ou tripanossomose humana africana é uma patologia parasitária
exclusivamente africana, cujo agente etiológico do género
Trypanosoma
é
transmitido pela picada da mosca tsé-tsé, pertencente ao género
Glossina
. Afeta
milhões de pessoas e animais anualmente, representando um grande fator de
atraso no desenvolvimento do continente africano. Caracteristicamente
negligenciada, poucos fundos são disponibilizadas para o controlo e investigação da
Tripanosomose Africana. Não existe vacina para a doença e os fármacos
disponíveis para o tratamento são pouco eficientes e apresentam elevada
toxicidade.
Amplificou-se a partir de cDNA extraído de formas sanguíneas de
T. b. brucei
a
sequência génica da enzima TSA, sugerindo a expressão da enzima TSA em
formas sanguíneas de
T. b. brucei
. Duas proteínas recombinantes de
T.
brucei
–
Glicoproteína Invariável de Superfície (ISG) e a região N-terminal da
Trans
-sialidase
(nTSA) foram subclonadas no vetor comercial pET28a. Através da subclonagem dos
genes de interesse ISG e TSA neste plasmídeo de expressão procariota - pET28a -
foi possível produzir as proteínas recombinantes ISG e nTSA em
Escherichia
coli
. Expressaram-se as proteínas recombinantes em várias linhagens celulares de
E. coli
e imunoidentificaram-se ambas através de i
mmunoblot
com soro de animais
positivos para
T. b. brucei
. Imunidentificou-se a proteína recombinante nTSA através
de
immunoblot
frente a soro de animais imunizados com o plasmídeo capacitado de
expressão em sistema eucariota nTSApVAX1. Avaliou-se o potencial imunogénico
dos plasmídeos ISGpVAX1, nTSApVAX1 e PLCpVAX1 através de imunização
génica do modelo experimental da THA. Processou-se soro de animais imunizados
com estes plasmídeos através de ELISA para deteção de anticorpos anti-
T. b.
brucei
.
Os três protótipos vacinais utilizados neste estudo foram capazes de induzir
anticorpos da classe IgG reativos ao extrato proteico de
T. brucei brucei
, sugerindo
então a expressão em formas sanguíneas do parasita dos antigénios ISG, TSA e
PLC.
Contrariamente ao que tem sido sugerido pela literatura até então, foi possível
amplificar de cDNA de formas sanguíneas de
T. b. brucei
o gene TSA, sugerindo
pela primeira vez a expressão deste gene nas formas sanguíneas de
T. b. brucei
.
VIDEIRA, Marco André Moras (2013) Estudo dos antiporters
Na+/H+NhaC e NhaE de Neisseria meningitidis, Dissertação de
Mestrado em Ciências Biomédicas, IHMT, Lisboa.
Os antiporters Na
+
/H
+
são proteínas membranares, encontradas em todos os reinos
e envolvidas na homeostasia do Na
+
e do pH. Dois antiporters Na
+
/H
+
, denominados
NmNhaC e NmNhaE
foram identificados no genoma da bactéria patogénica,
Neisseria meningitidis
,
e estudados através da sua expressão heteróloga numa