18 / 201
mais relevante é a glicoproteína B (gB) do vírus, codificada pelo gene UL55, sendo
um importante alvo do sistema imunitário do hospedeiro humano. Com base nas
variações de sequências deste gene, o vírus pode ser classificado em pelo menos,
4 genótipos distintos (gB1-4).
O objetivo do presente estudo foi determinar quais os genótipos para o UL55,
presentes em amostras de casos de infeção congénita e/ou perinatal utilizando a
técnica de PCR em tempo real. A confirmação dos resultados foi realizada por
técnicas de sequenciação (Sanger e
Next-Generation Sequencing
) e por análise do
polimorfismo do tamanho dos fragmentos de restrição (RFLP). No total, foram
analisadas 36 amostras de urina e 20 amostras de líquido amniótico (LA), colhidos
entre 2009 e 2016.
Das 35 amostras de urina genotipadas, em 29 foi detetado um genótipo (13 gB1; 7
gB2; 6 gB4; 3 gB3), sendo em 6 detetado mais do que um genótipo. Das 19
amostras de LA, em 17 foi detetado um genótipo (5 gB1; 5 gB2; 5 gB3; 2 gB4) e em
2 foi detetado mais do que um genótipo. Não houve amplificação em 2 amostras (1
urina e 1 LA).
Recorrendo às diferentes técnicas de confirmação, não foi possível confirmar a
presença de infeções mistas nem de 5 gB4 detetados em amostras de urina.
A nível nacional, o gB1 parece ser o genótipo mais frequente na infeção congénita,
em concordância com o descrito na literatura. Corroborámos também a ideia de que
todos os genótipos estão envolvidos neste tipo de infeção.
Por PCR em tempo real foi possível assinalar a existência de infeções mistas, no
entanto, estes dados devem ser alvo de melhor análise, dadas as contradições,
principalmente em comparação com a sequenciação.
LOPES, Elizeth do Rosário Delgado (2016) Desenvolvimento de novas
estratégias para a avaliação de compostos com potencial terapêutico
para a tuberculose e outras micobactérioses. Dissertação de Mestrado
em Microbiologia Médica, IHMT, Lisboa.
A multirresistência aos antibióticos em micobactérias, em particular
Mycobacterium
tuberculosis
, é hoje um problema de saúde pública global. Atualmente, para além da
ocorrência de mutações, o efluxo de antibióticos é considerado um importante fator
no desenvolvimento de resistência, abrindo novas perspetivas no desenho de
esquemas terapêuticos para as infeções causadas por estirpes resistentes,
nomeadamente pela combinação de antibióticos e inibidores de efluxo.
Nesta Dissertação, foi desenhado um modelo para rastreio e identificação de
compostos com atividade antimicobacteriana e/ou inibitória de efluxo, usando duas
estirpes isogénicas de
Mycobacterium smegmatis
; mc2155 (estirpe selvagem) e
XZL1675 (mc2155 Δ
lfrA
), que diferem entre si na capacidade de efluxo, devido à
deleção parcial da bomba de efluxo LfrA. Neste modelo, os compostos são
avaliados através da determinação da sua concentração mínima inibitória (CMI) e
da capacidade, a uma concentração subinibitória, de redução de CMIs de
antibióticos e brometo de etídio (EtBr). Os compostos com CMIs baixas (20 M) são
classificados como potenciais antimicobacterianos, enquanto aqueles capazes de
reduzir (≥ 4x) a CMI de outros compostos são classificados como potenciais