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PCR (nas amostras positivas na primeira abordagem), usando
primers
(G1 e G2),
desenhados no gene
secY
, presente em algumas espécies patogénicas de
Leptospira
; e
iii)
uma outra
nested
-PCR, com
primers
obtidos do gene
lipL32
codificante da proteína de superfície com o mesmo nome, comum a todas as
leptospiras patogénicas. Foram sequenciados alguns dos produtos amplificados, e
os resultados foram analisados por BLAST quanto à similaridade com sequências
depositadas no
GenBank
para as espécies de
Leptospira.
Foi detetado DNA de
Leptospira
spp., em 41 amostras, das quais 28 (68,3%)
corresponderam a leptospiras patogénicas, tendo a maioria revelado uma elevada
similaridade (98 - 99%) com a espécie
Leptospira interrogans
.
Os resultados obtidos mostraram a presença inequívoca de leptospiras patogénicas
nas coleções de água doce na região de Leiria, establecendo um alerta para as
Autoridades de Saúde locais, no sentido da intervenção na melhoria da qualidade
da água de modo a prevenir-se o risco de Leptospirose.
CALADO, Joana Lourenço Messias Calado (2016) Perfil de resistência
aos antibióticos e caracterização molecular de estirpes resistentes de
Neisseria Gonorrhoeae
e isoladas numa população de homens que têm
sexo com homens da área Metropolitana de Lisboa. Dissertação de
Mestrado em Microbiologia Médica, IHMT, Lisboa.
A infeção por
Neisseria gonorrhoeae
é a segunda infeção sexualmente
transmissível mais prevalente na Europa. Atualmente, a terapêutica indicada para o
tratamento da infeção por
N. gonorrhoeae
consiste na administração de ceftriaxona
em combinação com a azitromicina. No entanto, foram relatadas falhas terapêuticas
após a administração de cefalosporinas de terceira geração, a nível mundial.
A inexistência de uma alternativa à terapêutica de primeira linha, adequada e eficaz,
torna imperativo a realização de vigilância epidemiológica de resistências, sobretudo
nas populações de risco, como os homens que têm sexo com homens (HSH).
O conhecimento abrangente sobre a base genética associada a perfis de
suscetibilidade e resistência aos antibióticos tem elevada importância, uma vez que
os testes de amplificação de ácidos nucleicos estão a substituir rapidamente o
método de cultura no diagnóstico de infeção por
N. gonorrhoeae
.
O teste de suscetibilidade aos antibióticos foi realizado para a penicilina, a
tetraciclina, a espectinomicina, a ceftriaxona, a cefixima, a ciprofloxacina e a
azitromicina, através dos métodos difusão em disco e Etest, de forma a obter-se o
fenótipo de resistência de cada isolado de
N. gonorrhoeae
em estudo. Com base no
fenótipo de resistência, pesquisou-se a presença de mutações nos genes
penA
,
mtrR
,
parC
e
gyrA
.
Assim, na população estudada (homens que têm sexo com homens) obtiveram-se
30 culturas positivas para
N. gonorrhoeae,
das quais 73% apresentaram resistência
intermédia ou resistência à penicilina, 60% à tetraciclina e 37% à ciprofloxacina.
O reduzido número de casos positivos não permitiu retirar conclusões com valor
estatístico quantitativo, no entanto, qualitativamente, permitiu compreender que as