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Amostras de plasma de 66 indivíduos (1998-2001) foram testadas para anticorpos
anti-VHC (ensaio imunoenzimático) e RNA do VHC (amplificação da 5’UTR por RT-
PCR). Para identificar os subtipos de VHC e detectar recombinantes, as amostras
com RNA viral detectável foram sujeitas a amplificação, sequenciação e análise
filogenética de sequências nucleotídicas parciais para C/E1 e NS5B.
Encontrámos que 86,4% dos indivíduos possuíam anticorpos anti-VHC, 93,0% dos
quais com infecção activa. Todas as amostras, exceptuando duas, com RNA viral
detectável originaram amplicões para C/E1 e NS5B. A análise filogenética permitiu
incluir as estirpes de VHC nos subtipos 1a (43,8%), 1b (3,6%), 2a (1,8%), 3a
(21,1%), 4a (8,8%) e 4d (15,8%), revelando um padrão epidemiológico semelhante
ao dos UDIs de outros países do Sul da Europa. Apenas uma amostra apresentou
discordância entre os subtipos das duas regiões (4d para C/E1 e 4a para NS5B)
sugerindo um potencial recombinante intragenótipo.
No total, os subtipos 1a, 4a e 4d do VHC são responsáveis por 68,4% das infecções
nos UDIs infectados com VIH analisados. Considerando que apenas 20-30% dos
doentes positivos para VIH e co-infectados com os genótipos 1 e 4 respondem à
terapia do VHC e que ocorre transmissão do VHC dos UDIs para a população em
geral, são prioritários estudos alargados de vigilância epidemiológica e
implementação de estratégias de prevenção para controlar ambos os vírus neste
grupo de risco.
RODRIGUES, Rúben (2010) Aplicação de métodos moleculares ao
diagnóstico de Giardia lamblia e de Entamoeba spp., Dissertação de
Mestrado em saúde Tropical, IHMT, Lisboa.
Resumo:
Entamoeba histolytica
e
Giardia lamblia
são protozoários com distribuição
mundial que frequentemente infectam o Homem, sendo causadores de elevada
morbilidade associada com quadros de diarreia.
Este estudo consistiu na utilização de métodos moleculares na detecção e
identificação destes parasitas em amostras de fezes recebidas no Laboratório de
Patologia Tropical do Instituto de Higiene e Medicina Tropical (Lisboa, Portugal), no
período decorrente entre Setembro de 2007 e Agosto de 2009. .
Foi igualmente avaliada a eficácia e custo-benefício de um método alternativo de
conservação para material biológico fecal – o papel de filtro, para subsequente
extracção de DNA.
Foram analisadas microscopicamente 80 amostras, 23,8 % (19/80) das quais
positivas para
Giardia
e 27,5% (22/80) positivas para
Entamoeba
spp.. Através do
método molecular da PCR, amplificou-se com sucesso DNA de
Giardia
para o gene
ssurRNA
em 94,7% (18/19) das amostras microscopicamente positivas. No que se
refere às amostras positivas por exame microscópico para
Entamoeba
spp foi
detectada
E. dispar
em 50,0% (11/22) das amostras após amplificação de parte do
gene 16S
rRNA.
Adicionalmente foi também detectado DNA de
E. histolytica
em